无菌间使用标准操作规程

  无菌间使用标准操作规程 1 目的 确保无菌室环境的无菌状态，特指定本规程。 2 适用范围 适用于无菌间空气微生物监测。 3 职责 3.1实验室工作人员负责实验室空气微生物监测。 3.2 实验室主任监督实验室工作人员实施。 4 过程要求 4.1实验室工作人员在进无菌间之前，应先用2%石碳酸或来苏尔对手进行浸泡消毒。 4.2 缓冲间在每次使用前，应先打开紫外灯，紫外照射30 min；工作人员在进入无菌室前，必须于缓冲间内更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。 检验用的有关器材（待检品除外），搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。 4.3 将无菌间和生物安全柜的紫外灯打开照射30min后，才能进行工作。 4.4 实验完毕后，用0.2%新洁尔灭消毒液擦拭生物安全柜台面，打开生物安全柜内紫外灯，照射30min。同时无菌间和缓冲间的紫外灯一并打开，照射30min。 4.5 工作人员在缓冲间脱下工作服、工作帽及工作鞋。 4.6 每月应对无菌间进行一次熏蒸消毒。每月用新洁尔灭消毒液擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。 4.7 每月应对无菌间进行一次无菌检查记录 4.7.1 营养琼脂平板的制备 按营养琼脂说明书配制营养琼脂，120℃15min高压灭菌后，冷却到50℃左右倾倒于9cm的平板。待琼脂凝固后，放37℃ 48h 培养，无菌生长，方可以使用。 4.7.2 沉降菌数测定 先打开无菌室内紫外灯照射30min后，将备妥的营养琼脂平板5个。以无菌方式移入操作间，置四个角落和中央各1个，开盖，暴露30分钟后将盖盖上。在37℃培养箱 实验室生物安全标准操作规程（SOP） ZHCADC-PGC09-2010 无菌间使用标准操作规程 第  2  页    共   2  页 第  1  版    第   0  次  修订 2010年 1月 11日发布/1月20日实施   内倒置培养48h，取出检查。分别数出5个平板的生长菌落数并得出5个平板的平均菌落数。 4.7.3结果判定 无菌室内的洁净级别应达到10000级，即在进行沉降菌数测定时，平均菌落数应小于或等于 3个（φ90mm，0.5h）。如所测得的平均菌落数小于3个，则证明该无菌室无菌程度符合要求，否则该无菌室的无菌程度不符合要求，需要对无菌间进行彻底消毒，直至重复检查符合要求为止。      

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